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When water freezes at 0C, a rigid open lattice (like a web) of hydrogen-bonded molecules is formed

Cells were used within three months post-thawing and cultured in RPMI 1640 medium (#01859-34, Nacalai Tesque, Kyoto, Japan) with 10% fetal bovine serum (#30264-85, Nacalai Tesque, Kyoto, Japan), 2 mM glutamine, 50 U/mL penicillin, and 100 g/mL streptomycin (#26253-84, Nacalai Tesque, Kyoto, Japan)