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Sixteen hours post-transfection, the medium was replaced with fresh complete DMEM, and viral supernatants were harvested 48 hours later, clarified through a 0.45 m filter, and stored on ice

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Both have finite shelf lives once reconstituted, typically 4 to 6 weeks refrigerated

To exclude non-specific hits, we further validated these hits in TNF/cycloheximide (CHX)-induced HepG2 liver cell pyroptosis model, which was mediated by caspase-3-GSDME pathway 20